小鼠血管紧张素2(Ang-II)酶联免疫试剂盒-上海笃玛生物科技有限公司

您当前的位置：网站首页 > 产品展厅 >ELISA试剂盒 >小鼠ELISA试剂盒 >小鼠血管紧张素2(Ang-II)酶联免疫试剂盒

产品展厅

小鼠血管紧张素2(Ang-II)酶联免疫试剂盒

品牌：DUMABIO

产地：上海

型号：48/96T

货号：DM-X6648

价格： ￥1860/盒
发布日期： 2025-04-23
更新日期： 2025-04-23

发送咨询信息

产品详请

产地	上海
保存条件	2-8°
品牌	DUMABIO
货号	DM-X6648
用途	科研实验
检测方法
保质期	6个月
适应物种
检测限
数量	999
包装规格	48/96T
标记物
样本
应用
是否进口	否

小鼠血管紧张素2(Ang-II)酶联免疫试剂盒

本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断

产品货号：DM-X6648

产品规格：【48T/96T】

检测原理主要有双抗体夹心法和竞争法，具体如下：

双抗体夹心法：
- 抗体包被：将特异性针对小鼠 Ang - II 的捕获抗体预先包被在微孔板表面。
- 加样与孵育：往包被好抗体的微孔中依次加入标本、标准品以及 HRP 标记的检测抗体。标本和标准品中的 Ang - II 会与包被在微孔表面的捕获抗体特异性结合，形成抗原 - 抗体复合物。随后加入的 HRP 标记检测抗体也会与 Ang - II 结合，形成捕获抗体 - Ang - II - HRP 标记检测抗体的 “三明治” 结构。
- 洗涤：通过温育后，洗去未结合的物质，包括未与 Ang - II 结合的 HRP 标记检测抗体、标本或标准品中的其他杂质等，以确�：笮觳獾淖既沸�。
- 显色：加入底物 TMB，在过氧化物酶（即 HRP）的催化下，TMB 会转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠 Ang - II 含量呈正相关。
- 测定与计算：用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（OD 值）。以所测标准品的 OD 值为横坐标，标准品的浓度值为纵坐标，绘制标准曲线，并得到直线回归方程。将样品的 OD 值代入方程，即可计算出样品中小鼠 Ang - II 的浓度。
竞争法：
- 抗原包被：将 Ang - II 抗原预先包被在微孔板上。
- 加样与竞争结合：往包被好抗原的微孔中加入标本或标准品，同时加入一定量的生物素标记的 Ang - II。标本或标准品中的 Ang - II 与生物素标记的 Ang - II 会竞争结合包被在微孔表面的 Ang - II 抗体。
- 洗涤与结合酶标物：洗去未结合的物质后，加入 HRP - 链霉亲和素缀合物（SABC），生物素会特异性地与链霉亲和素结合，形成免疫复合物。
- 洗涤与显色：再次洗涤后，加入底物 TMB，HRP 催化 TMB 显色，颜色的深浅与样品中的 Ang - II 含量呈负相关，即样品中 Ang - II 浓度越高，结合到包被抗体上的生物素标记 Ang - II 就越少，显色越浅。
- 测定与计算：用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过与标准曲线对比，计算出样品中 Ang - II 的浓度。

试剂准备：从冰箱中取出试剂盒，室温平衡 30 分钟，确保所有试剂温度一致。同时，按照说明书要求配制所需的洗涤液、标准品稀释液等工作液。
样本准备：根据样本类型（血清、血浆、细胞培养上清等）和说明书要求进行处理，如血清样本需在采集后尽快离心分离，避免溶血。

仪器准备：准备好酶标仪、洗板机（可�。�、移液器、吸头、蒸馏水或去离子水等。

ELISA试剂盒操作步骤：
1.使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。
2.根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。
3.加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的*标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。
4.甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
5.每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。
6.甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
7.每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。
8.取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。
9.在450nm波长处测定各孔的OD值。

结果分析

绘制标准曲线：以标准品浓度为横坐标，对应的吸光度值为纵坐标，在坐标纸上绘制标准曲线，或使用软件（如 Excel、GraphPad Prism 等）进行线性回归分析，得到标准曲线方程。

注意事项

本试剂盒仅用于科研实验，严禁用于临床诊断、或其他非科研用途。使用试剂盒前，请仔细阅读说明书，熟悉操作步骤和注意事项。

实验过程中，应严格遵守实验室安全操作规程，穿戴好防护服、手套、护目镜等防护用品。试剂盒中的某些试剂可能具有毒性或腐蚀性，如酶标试剂、终止液等，操作时需特别小心，避免接触皮肤、眼睛和口腔。若不慎接触，应立即用大量清水冲洗，并及时就医。

试剂盒从冰箱取出后，需在室温下充分平衡后再使用，避免因温度差异导致实验误差。不同批次的试剂盒可能存在一定差异，请勿混用不同批次的试剂盒组分，以免影响检测结果的准确性和重复性。

试剂盒选择

· 评估性能指标：查看试剂盒的说明书，关注灵敏度、特异性、重复性等性能指标。灵敏度反映了试剂盒检测低浓度目标物的能力；特异性体现了试剂盒对目标物的识别准确性，避免与其他类似物质发生交叉反应；重复性则通过多次检测同一样本的结果一致性来评估。

上海笃玛生物科技有限公司

彩神vll官网-追求健康,你我一起成长

试剂盒选择