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小鼠溶质转运家族18,成员1蛋白(Slc18a1)酶联免疫试剂盒
  • 品牌：DUMABIO
  • 产地：上海
  • 型号：48/96T
  • 货号：DM-X6656
  • 价格： ￥1860/盒
  • 发布日期： 2025-04-22
  • 更新日期： 2025-04-22
产品详请
产地 上海
保存条件 2-8°
品牌 DUMABIO
货号 DM-X6656
用途 科研实验
检测方法
保质期 6个月
适应物种
检测限
数量 999
包装规格 48/96T
标记物
样本
应用
是否进口 否

小鼠溶质转运家族18,成员1蛋白(Slc18a1)酶联免疫试剂盒

本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断


产品货号：DM-X6656

产品规格：【48T/96T】

小鼠溶质转运家族 18，成员 1 蛋白（Slc18a1）酶联免疫试剂盒是一种用于定量检测小鼠样本中 Slc18a1 蛋白含量的工具，以下是其相关介绍：

检测原理

通常采用双抗体夹心 ELISA 法。试剂盒中的微孔板预先包被有针对小鼠 Slc18a1 蛋白的特异性抗体。加入样本后，样本中的 Slc18a1 蛋白与包被抗体特异性结合。接着加入生物素标记的抗小鼠 Slc18a1 二抗，它会与已结合在包被抗体上的 Slc18a1 蛋白形成抗体 - 抗原 - 二抗复合物。再加入亲和素 - 辣根过氧化物酶（HRP）结合物，亲和素与生物素特异性结合，使 HRP 连接到复合物上。加入底物溶液后，HRP 催化底物发生显色反应，生成有色产物。颜色深浅与样本中 Slc18a1 蛋白的含量呈正相关，通过酶标仪测定吸光度，再根据标准曲线计算出样本中 Slc18a1 蛋白的浓度。

试剂盒组成

  • 预包被板：表面包被有抗小鼠 Slc18a1 蛋白抗体的微孔板，是反应的固相载体。
  • 标准品：一系列已知浓度的小鼠 Slc18a1 蛋白标准品，用于制作标准曲线，一般包含 6 - 8 个不同浓度梯度。
  • 生物素标记抗体：抗小鼠 Slc18a1 的生物素标记二抗，可与 Slc18a1 蛋白特异性结合，并带有生物素基团，用于与亲和素 - HRP 结合物结合。
  • 亲和素 - HRP 结合物：含有亲和素和辣根过氧化物酶，亲和素可与生物素特异性结合，HRP 用于催化底物显色。
  • 底物溶液：通常为 TMB 等过氧化物酶底物，在 HRP 作用下会发生颜色变化，如从无色变为蓝色，再在终止液作用下变为黄色。
  • 洗涤缓冲液：多为含吐温 - 20 的磷酸盐缓冲液（PBS - T），用于洗涤微孔板，去除未结合的物质，减少非特异性吸附和背景干扰。
  • 终止液：一般为硫酸溶液，用于终止底物显色反应，使颜色稳定，便于酶标仪读数。
  • 说明书：详细介绍了试剂盒的使用方法、操作步骤、注意事项、储存条件等信息。

操作步骤

  1. 样本收集与处理：根据实验需求收集小鼠的血清、血浆、细胞培养上清或组织匀浆等样本。血清和血浆样本需离心去除杂质，组织匀浆需按规定方法制备并离心取上清，细胞培养上清直接收集。样本收集后若不能立即检测，需按要求保存于合适温度（如 - 20℃或 - 80℃）。
  2. 准备试剂：将试剂盒从冷藏环境取出，平衡至室温。按说明书要求稀释生物素标记抗体、亲和素 - HRP 结合物等试剂。
  3. 加样：将标准品和处理后的样本加入预包被板的微孔中，每个样本和标准品设复孔，每孔加入规定体积的液体（如 100μL）。轻轻振荡微孔板，使液体充分混合，然后在规定温度（如 37℃）下孵育一定时间（如 1 - 2 小时），让样本中的 Slc18a1 蛋白与包被抗体充分结合。
  4. 洗涤：孵育结束后，倒掉微孔中的液体，用洗涤缓冲液洗涤微孔板，一般洗涤 3 - 5 次，每次浸泡一定时间（如 3 - 5 分钟），然后拍干或甩干微孔板，以去除未结合的物质。
  5. 加二抗：向每个微孔中加入稀释好的生物素标记抗体，每孔加入适量体积（如 100μL），轻轻振荡混匀，在规定温度下孵育一段时间（如 1 小时），使二抗与结合在包被抗体上的 Slc18a1 蛋白结合。
  6. 洗涤：同步骤 4，再次用洗涤缓冲液洗涤微孔板，以去除未结合的二抗和其他杂质。
  7. 加亲和素 - HRP 结合物：加入稀释好的亲和素 - HRP 结合物，每孔加入一定体积（如 100μL），轻轻振荡，在规定温度下孵育适当时间（如 30 - 60 分钟），使 HRP 连接到复合物上。
  8. 洗涤：重复步骤 4 的洗涤操作，以去除未结合的亲和素 - HRP 结合物。
  9. 显色：向每个微孔中加入底物溶液，每孔加入适量体积（如 100μL），轻轻振荡混匀，在避光条件下室温孵育一段时间（如 15 - 30 分钟），观察颜色变化。
  10. 终止反应：当颜色变化达到合适程度时，向每孔加入终止液，一般每孔加入 50μL 或其他规定体积，轻轻振荡混匀，终止显色反应。此时溶液颜色会稳定下来。
  11. 读数：立即将微孔板放入酶标仪中，在规定的波长下（如 450nm）测定各孔的吸光度值。
  12. 结果计算：根据标准品的浓度和对应的吸光度值绘制标准曲线，然后根据样本的吸光度值从标准曲线上查得相应的浓度，即为样本中 Slc18a1 蛋白的含量。也可使用酶标仪自带的软件进行标准曲线拟合和样本浓度计算。

注意事项

  • 试剂盒应在规定的温度下储存和使用，避免反复冻融。
  • 严格按照说明书的要求进行操作，确保加样准确、孵育时间和温度正确、洗涤充分，以保证实验的准确性和重复性。
  • 洗涤过程要注意避免残留杂质影响结果，同时防止过度洗涤导致抗体或抗原丢失。
  • 加样时要使用不同的移液器吸头，避免交叉污染。
  • 底物溶液应现用现配，显色反应需在避光条件下进行。
  • 实验中使用的试剂和样本应视为潜在的生物�：ξ镏剩聪喙毓娑ù恚苊饨哟テし艉臀笫场�

应用领域

  • 用于研究小鼠体内 Slc18a1 蛋白在生理过程中的作用，如神经递质代谢、细胞信号转导等方面的机制研究。
  • 在药物研发中，可用于评估药物对小鼠 Slc18a1 蛋白表达或功能的影响，为开发相关药物提供实验依据。



上海笃玛生物科技有限公司





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