以下是关于人孤腓肽(OFQ/N)酶联免疫试剂盒的相关信息:
- 检测原理:大多采用双抗体夹心 ELISA 法。将抗人 OFQ/N 抗体包被在酶标板上,加入标准品或待测样本,样本中的 OFQ/N 会与包被抗体结合,洗去未结合物质。随后加入生物素化的抗人 OFQ/N 抗体,其与已结合的 OFQ/N 相结合,再加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,形成抗体 - 抗原 - 生物素化抗体 - 酶标亲和素复合物。洗涤去除未结合成分后,加入显色底物 TMB,在辣根过氧化物酶催化下,TMB 显蓝色,加入终止液后变为黄色。通过酶标仪在 450nm 波长处测量吸光度,与标准曲线比较,得出样本中 OFQ/N 的浓度。
- 检测范围:试剂盒检测范围有差异,例如部分产品检测范围可能在 0.3 - 18ng/mL 。
- 灵敏度:试剂盒灵敏度不同,如有的可达 0.06ng/mL 。
- 样本类型:常见有血清、血浆、细胞培养上清液、组织匀浆等生物学样本。
- 试剂盒组成:通常包含预包被的 96 孔微孔板、标准品、标准品稀释液、检测试剂 A(生物素标记的抗体)、检测试剂 B(HRP 标记的亲和素)、TMB 底物、终止液、洗涤缓冲液、封板膜、产品说明书等。
- 保存条件:多数需在 -20℃或 4℃保存,具体依试剂盒说明书,部分试剂盒不同组分保存温度不同,像 TMB 底物、洗涤缓冲液(浓缩液)和终止液 4℃保存,其他 -20℃保存。
- 检测时间:操作熟练时,整个检测流程约 3 - 5 小时。