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人乳过氧化物酶(LPO)酶联免疫试剂盒

本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断

产品货号：DM5767

产品规格：【48T/96T】

• 种类丰富：涵盖多种种属和指标的检测，如犬免疫球蛋白 E、鸡晶体蛋白、人激活素 B 等，还包括大鼠的多种指标检测试剂盒，能满足不同科研需求。
• 性能优良
  • 准确性高：标准品线性回归与预期浓度相关系数 R 值大于等于 0.9900。
  • 灵敏度高：如犬免疫球蛋白 E 的 ELISA 试剂盒检测浓度小于 1.0pg/mL，鸡晶体蛋白的 ELISA 试剂盒检测浓度小于 10pg/mL。
  • 特异性强：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
  • 重复性好：板内、板间变异系数均小于 15%。
• 组成齐全：以犬免疫球蛋白 E (IgE) ELISA 试剂盒为例，包含微孔酶标板、标准品、样本稀释液、检测抗体 - HRP、20× 洗涤缓冲液、底物 A、底物 B、终止液、封板膜、说明书、自封袋等。
• 适用样本类型多样：适用于血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等多种标本类型。
• 保存条件及有效期明确：通常保存在 2-8℃，避光防潮保存，有效期一般为 6 个月。

1. 温育：从室温平衡 20min 后的铝箔袋中取出所需板条，设置标准品孔、样本孔和空白孔，标准品孔各加不同浓度的标准品 50μL，待测样本孔先加待测样本 10μL，再加样本稀释液 40μL，随后标准品孔和样本孔中（空白孔不加）加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体 50μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育 60min。
2. 洗板：弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置 1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板 5 次（也可用洗板机洗板），此过程约 10 分钟。
3. 显色：所有孔加入底物 A、B 各 50μL，37℃避光孵育 15min。
4. 终止及检测：所有孔加入终止液 50μL，15min 内，在 450nm 波长处测定各孔的 OD 值。

ELISA 具有灵敏度高、特异性强、操作简便、可同时检测大量样品等优点，因此在基础研究、临床诊断、生物制药等领域都有着广泛的应用。但该方法也存在一些局限性，如需要特异性的抗体和抗原、可能存在交叉反应、对实验条件要求较高等。

人乳过氧化物酶（LPO）酶联免疫试剂盒是一种用于检测人乳中 LPO 含量的工具。

以下将对其进行详细介绍：

• 一、LPO 的重要性及检测需求
  • 在人乳中的作用：乳过氧化物酶通常在整个泌乳期存在于人乳中，并且可能有助于乳汁的保护作用。人类初乳中含有两种含血红素的过氧化物酶，即分泌型乳过氧化物酶和白细胞衍生的髓过氧化物酶，它们通过 活性发挥宿主防御作用。LPO 在过氧化氢存在下将唾液中的硫氰酸盐离子氧化为具有 活性的产品。
  • 检测的必要性：由于我们对母乳中乳过氧化物酶的了解仍然有限，因此需要一种有效的检测手段来定量人乳中的 LPO 含量。酶联免疫试剂盒可以提供一种快速、准确的方法来检测 LPO 浓度，有助于研究人员更好地了解 LPO 在人乳中的作用以及其与其他因素的关系。
• 二、人乳过氧化物酶酶联免疫试剂盒的原理
  • 抗体的作用：人乳过氧化物酶酶联免疫试剂盒通常使用针对重组人乳过氧化物酶的抗体。多克隆抗体被用于纯化和定量 LPO。免疫球蛋白 G（IgG）通过蛋白 A 柱分离，并通过免疫印迹进行表征。天然和生物素化的 IgG 分别用作捕获抗体和检测器抗体，通过夹心酶联免疫吸附测定法确定乳过氧化物酶的浓度。
  • 检测过程：首先，将样本与人乳过氧化物酶酶联免疫试剂盒中的抗体结合。然后，通过一系列化学反应，产生可检测的信号。 ，根据信号的强度，可以确定样本中 LPO 的浓度。
• 三、人乳过氧化物酶酶联免疫试剂盒的特点
  • 高灵敏度：一些研究开发了更敏感的微板荧光测定法，用于测定牛奶中的 LPO 活性。这种方法特别适用于牛奶 LPO 活性测量，因为它消除了本土牛奶过氧化氢和硫氰酸盐的影响。例如，该方法在牛奶中检测 LPO 的检测限为 7.1×10?? U/mL，具有良好的批内和批间精度。
  • 特异性强：由于使用了针对 LPO 的特异性抗体，人乳过氧化物酶酶联免疫试剂盒可以准确地检测人乳中的 LPO，而不会受到其他物质的干扰。
  • 操作简便：试剂盒通常提供了详细的操作说明，使得用户可以轻松地进行检测。不需要复杂的仪器设备，适合在实验室和商业规模中使用。
• 四、人乳过氧化物酶酶联免疫试剂盒的应用
  • 科学研究：在科学研究中，人乳过氧化物酶酶联免疫试剂盒可以用于研究 LPO 在人乳中的浓度变化与泌乳期、母亲健康状况等因素的关系。例如，通过检测不同泌乳阶段的人乳中 LPO 的含量，可以了解 LPO 在整个泌乳期的变化规律。
  • 临床诊断：虽然目前关于 LPO 在临床诊断中的应用还比较有限，但随着对 LPO 功能的深入研究，人乳过氧化物酶酶联免疫试剂盒可能在未来的临床诊断中发挥重要作用。例如，检测母乳中 LPO 的含量可以作为评估婴儿健康状况的一个指标。
  • 食品行业：LPO 是牛奶中的主要 成分之一，也是广泛用于牛奶热处理的指标。人乳过氧化物酶酶联免疫试剂盒可以用于检测牛奶中的 LPO 含量，以评估牛奶的质量和安全性。
• 五、人乳过氧化物酶酶联免疫试剂盒的发展前景
  • 技术改进：随着技术的不断进步，人乳过氧化物酶酶联免疫试剂盒的性能将不断提高。例如，通过优化抗体的制备方法、提高检测的灵敏度和特异性、简化操作流程等，可以使试剂盒更加实用和可靠。
  • 应用拓展：除了在科学研究、临床诊断和食品行业中的应用，人乳过氧化物酶酶联免疫试剂盒还可能在其他领域得到应用。例如，在化妆品行业中，LPO 由于其抗氧化和 作用，可能成为一种有潜力的活性成分。通过检测化妆品中的 LPO 含量，可以评估产品的功效和安全性。
  • 与其他技术的结合：人乳过氧化物酶酶联免疫试剂盒可以与其他技术结合使用，以提高检测的准确性和可靠性。例如，与分子生物学技术结合，可以研究 LPO 的基因表达和调控机制；与生物信息学技术结合，可以分析 LPO 的结构和功能关系。

总之，人乳过氧化物酶酶联免疫试剂盒是一种重要的检测工具，具有高灵敏度、特异性强、操作简便等特点。它在科学研究、临床诊断和食品行业等领域具有广泛的应用前景。随着技术的不断进步，人乳过氧化物酶酶联免疫试剂盒的性能将不断提高，应用范围也将不断拓展。

类型

1. 评估试剂盒性能指标
   • 灵敏度：灵敏度是指试剂盒能够检测到的 目标物浓度。根据实验需求选择具有合适灵敏度的试剂盒。如果需要检测低丰度的目标物，如一些微量的细胞因子或激素，就需要选择灵敏度高的试剂盒，通常其检测下限能够达到 pg/mL 级别。
   • 特异性：特异性反映了试剂盒检测目标物的专一性，即试剂盒只对目标抗原或抗体产生反应，而与其他相关物质无交叉反应或低交叉反应。查看试剂盒说明书中关于特异性的描述，了解其对目标物的识别能力以及可能存在的交叉反应情况。可以通过查阅相关文献或咨询试剂盒供应商来获取更多关于特异性的信息。
   • 准确性：准确性是指检测结果与真实值的接近程度。一般通过回收率实验来评估试剂盒的准确性，即向已知浓度的样本中加入一定量的目标物，然后检测回收率。理想的试剂盒回收率应在 90% - 110% 之间。
   • 精密度：精密度包括批内精密度和批间精密度。批内精密度是指在同一批次试剂盒中，对同一样本进行多次检测的结果重复性；批间精密度是指不同批次试剂盒对同一样本检测结果的一致性。选择精密度高的试剂盒，能够保证实验结果的稳定性和可靠性，通常批内变异系数（CV）应小于 10%，批间 CV 应小于 15%。
2. 查看试剂盒组成和规格
   • 试剂盒组成：查看试剂盒的组成成分，确保包含所有必要的试剂，如包被板、标准品、酶标抗体、底物、洗涤液、终止液等。有些试剂盒可能还会提供样本稀释液、封闭液等辅助试剂。了解各试剂的性质、保存条件和使用方法，确保其与实验条件相匹配。
   • 规格选择：根据实验的样本数量和检测次数选择合适规格的试剂盒。试剂盒的规格通常以孔数来表示，如 96 孔板或 384 孔板。如果样本量较大，可选择大规格的试剂盒以节省成本和时间；如果是小型实验或预实验，也可以选择小规格的试剂盒。

操作步骤

结果分析

绘制标准曲线：以标准品浓度为横坐标，对应的吸光度值为纵坐标，在坐标纸上绘制标准曲线，或使用软件（如 Excel、GraphPad Prism 等）进行线性回归分析，得到标准曲线方程。