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人基质金属蛋白酶8(MMP-8)酶联免疫试剂盒

本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断

产品货号：DM-5848

以下是关于人基质金属蛋白酶8(MMP-8)酶联免疫试剂盒的相关介绍：

基本信息

• 英文名称：Human MMP-8(Matrix Metalloproteinase 8) ELISA Kit 。
• 常用规格：48T/96T。
• 适用范围：主要用于科研实验，禁用于临床诊断。

检测原理

• 双抗体夹心法：将特异性抗人 MAT 抗体预包被在酶标板上，加入标准品、待测样本和生物素化的检测抗体，样本中存在的 MAT 与固相抗体和检测抗体结合，洗涤后加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素，再加入显色底物 TMB，颜色反应的深浅与样本中 MAT 的浓度成正比。
• 竞争法：将已知抗原包被在酶标板上，加入待测样本和酶标记的抗原，样本中的抗体与酶标记抗原竞争结合包被抗原，洗涤后加入底物显色，颜色深浅与样本中抗体含量成反比。

• 标本的采集及保存

  1.血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃过一晚后于1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。 

  2.血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。 

  3.细胞培养物上清或其它生物标本：1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。 (注：标本溶血会影响**检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。) 

  
  

试剂盒组成

• 固相载体：已包被抗原或抗体的 96 孔聚苯乙烯酶标板。
• 酶标记物：酶标记的抗原或抗体。
• 底物：如 TMB，在酶的作用下发生显色反应。
• 对照品：阴性对照品和阳性对照品用于定性测定，参考标准品用于定量测定。
• 稀释液：用于稀释结合物及标本。
• 洗涤液：常用含 0.05% 吐温 20 磷酸缓冲盐水。
• 终止液：如硫酸，用于终止酶反应。

样本类型

包括血清、血浆、细胞培养上清、组织匀浆液等液体样本。

操作步骤

1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；

3. 样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加。

4. 除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。

6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7. 每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

结果判断

绘制标准曲线：在Excel工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。

试剂盒性能

1. 准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。

2. 灵敏度： 检测浓度小于10 pg/mL。

3. 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

4. 重复性：板内、板间变异系数均小于15%。

5. 贮藏：2-8℃，避光防潮保存。

6. 有效期：6个月

品牌与价格

• 上海笃玛生物科技有限公司：特异性强、灵敏度高、稳定性好、免费代测，价格需询价。