牛促甲状腺激素抗体(TSA)ELISA试剂盒-上海笃玛生物科技有限公司

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牛促甲状腺激素抗体(TSA)ELISA试剂盒

品牌：DM

产地：上海

货号：电询

发布日期： 2024-08-12
更新日期： 2024-10-09

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产地	上海
保存条件	-2.8℃
品牌	DM
货号	电询
用途	科研与实验
检测方法	吸附测定法
保质期	6个月
适应物种
检测限	猪
数量	1000
包装规格	96T/48T
标记物	电询
样本	血清,细胞,细胞上清液、体液等
应用	科研试剂
是否进口	否

牛促甲状腺激素抗体(TSA)ELISA试剂盒

一、实验原理竞争ELISA
此法主要用于测定小分子抗原及半抗原，其原理类似于放射免疫测定。其基本程序为：
① 抗体包被 → 4℃过夜，洗涤三次、抛干
② 加入待检抗原及一定量的酶标抗原（对照孔仅加酶标抗原）→ 37℃ 60分钟，洗涤三次、抛干
③ 加底物液 → 37℃ 20分钟，加终止液
④ 用ELISA检测仪测定OD值。
被结合的酶标抗原的量由酶催化底物反应产生有色产物的量来确定，如果待检溶液中抗原越多，被结合的标记抗原的量就越少，有色产物就减少，这样根据有色产物的变化就可求出未知抗原的量。此法的优点在于快速、特异性高、且可用于小分子抗原及半抗原的检测；其主要不足在于每种抗原都要进行酶标记，而且因为抗原的结构不同，还需应用不同的结合方法。此外，试验中应用酶标抗原的量较多

二、样本处理要求

1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。

3.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

5.组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。

6.标本采集后尽早进行提�。崛“聪喙匚南捉校崛『笥】旖惺笛�。若不能人上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.

7.不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

三、检测原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被相关指标的抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的相关指标呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心 10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心 30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心 10 分钟去除颗�：途酆衔�。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心 10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

四、不同研究领域对应的指标：
研究方向检测指标
细胞 IFN-γ、TNF-a、IL-2、IL-6、IL-10、IL-15、IL-21、Granzyme B 、GM-CSF、BCMA、IDO、HGF……
感染?IFN-γ、TNF-α、IL-1β、IL-2、IL-6、GM-CSF、CRP、IFN-β、IL-10、IL-18、MCP-1、FGF-19……
免疫/自免 IL-4、IL-5、IL-6、IL-12p70、IL-13、IL-17、IL-18、IL-21、IL-23、CXCL1、MMP-9、TNF-α、GM-CSF、G-CSF……
PD-1、PD-L1、VEGF、VEGFR2、BCMA、TGF-b、FGF-19、PDGF-BB、HGF、CD25、CD28……
心?ST2、PCSK9、ACE2、HGF、VEGF、TGF-β1、PDGF-BB、ANGPTL3、GH、CRP……
Insulin、Glucagon、Leptin、C-peptide、HGF、ACE2、VEGF、CRP……
神经科 BDNF、b-NGF、Neuropilin-1、ACE2、TGF-β1、VEGF、IL-8、MMP-9、Leptin……

五、注意事项

1. 严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。

2. 洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。

3. 消除板底残留的液体和手指�。裨蛴跋霴D值。

4. 底物显色液应呈无色或很浅的颜色，已经变蓝的底物液不能使用。

5. 避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。

6. 在储存和温育时避免强光直接照射。

7. 平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。

8. 任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。

9. 不能使用过期产品。

10. 实验还需要酶标仪（450nm），37℃恒温箱，高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL以及蒸馏水或去离子水。

11. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。

12. 20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。

13. 如果可能传播疾�。械难范加芾砗茫凑展娑ǖ某绦虼硌泛图觳庾爸�。

六、操作步骤

	1. 对应板孔中加入100μL标准品工作液或样本，37℃孵育90分钟
	2. 弃掉板内液体后，立即加入100μL生物素化抗体工作液，37℃孵育60分钟
	3. 弃掉板内液体，洗板3次
	4. 每孔加入100μL HRP酶结合物工作液，37℃孵育30分钟，弃掉板内液体，洗板5次
	5. 每孔加入90μL底物溶液，37℃孵育15分钟左右
	6. 每孔加入50μL终止液
	7. 立即在450nm波长下读数，处理数据

七、实验结果计算

以所测标准品的OD值为横坐标，标准品的浓度值为纵坐标，在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线，并得到直线回归方程，将样品的OD值代入方程，计算出样品的浓度。

人整合素β-1(ITGB1)酶联免疫试剂盒	Sandwich	15.6 pg/mL	62.5-4000 pg/mL
人抗缪勒管激素(AMH)酶联免疫吸附测定试剂盒	Sandwich	25.97 pg/mL	78.13-5000pg/mL
人基质金属蛋白酶9(MMP-9)酶联免疫吸附测定试剂盒	Sandwich	0.05 ng/mL	0.16-10ng/mL
人神经特异性烯醇化酶(NSE)酶联免疫吸附测定试剂盒	Sandwich	35.16 pg/mL	78.13-5000pg/mL
人蛋白C(PROC)酶联免疫吸附测定试剂盒	Sandwich	37.5 pg/mL	62.5-4000pg/mL
人神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)酶联免疫吸附测定试剂盒	Sandwich	9.38 pg/mL	15.63-1000pg/mL
人骨骼肌快肌肌钙蛋白T(TnTf/TNNT3)酶联免疫吸附测定试剂盒	Sandwich	9.38 pg/mL	15.63-1000pg/mL

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