猪血管性血友病因子(VWF)酶联免疫试剂盒-上海笃玛生物科技有限公司

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猪血管性血友病因子(VWF)酶联免疫试剂盒

起订量 (盒)价格

1-2￥1896 /盒

≥2￥1680 /盒

品牌：DM

产地：上海

型号：96T/48T

货号：DM-P5460

发布日期： 2023-12-15
更新日期： 2024-10-09

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产品详请

产地	上海
保存条件	?2.8℃
品牌	DM
货号	DM-P5460
用途
检测方法	吸附测定法
保质期	6个月
适应物种	猪
检测限	猪
数量	1000
包装规格	96T/48T
标记物	电询
样本	?血清,细胞,细胞上清液、体液等
应用	科研试剂
是否进口	否

猪性因子(VWF)酶联免疫试剂盒

适用的样本类型

血清、血浆、细胞上清液、胸腹水、脑脊液、处理后的固体样本等
检测方法
双抗体夹心法
用途
科学研究
试剂盒性能
有效期:6个月保存条件:2-8℃,避光防潮保存
准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数 R 值,大于等于 0.9600
特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应

重复性:板内、板间变异系数均小于 15%

猪性因子(VWF)酶联免疫试剂盒

检测原理

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被相关指标的抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的相关指标呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心 10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心 30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心 10 分钟去除颗�：途酆衔�。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心 10 分钟取上清。

5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

应猪性因子(VWF)酶联免疫试剂盒

猪性因子(VWF)酶联免疫试剂盒

自备物品
1. 酶标仪(450nm)
2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
操作注意事项
1. 试剂盒保存在 2-8℃,使用前室温平衡 20 分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
3. 浓度为 0 的标准品可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释 5 倍,最终结果乘以5才是样本最终浓度。
4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5. 所有液体组分使用前充分摇匀。
6. 若中英文说明书有误,请以中文说明书为准。
7. 20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按 1:20 稀释,即 1 份的 20×洗涤缓冲液加 19 份的蒸馏水。

8. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

猪性因子(VWF)酶联免疫试剂盒

洗板方法

1.手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置 1min 后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板 5次。
2.自动洗板机:每孔注入洗液 350μL,浸泡 1min,洗板 5 次。
试剂盒组成
名称 96 孔配置 48 孔配置备注
微孔酶标板 12 孔×8 条 12 孔×4 条无
标准品 0.5mL 0.5mL 按说明书进行稀释
标准品稀释液 6mL 3mL 按说明书进行稀释
样本稀释液 6mL 3mL 按说明书进行稀释
检测抗体-HRP 6mL 3mL 无
20×洗涤缓冲液 20mL 20mL 按说明书进行稀释
底物 A 6mL 3mL 无
底物 B 6mL 3mL 无
终止液 6mL 3mL 无
封板膜 2 张 2 张无
说明书 1 份 1 份无
自封袋 1 个 1 个无

猪性因子(VWF)酶联免疫试剂盒

操作步骤

1.从室温平衡 20min 后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回 4℃。
2. 设置标准品孔、样本孔和空白孔,空白孔什么都不加;标准品孔各加不同浓度的标准品 50μL;
3. 待测样本孔先加待测样本 10μL,再加样本稀释液 40μL;
4. 随后标准品孔和样本孔中(空白孔不加)加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体 50μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育 60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置 1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板 5 次(也可用洗板机洗板)。
6. 所有孔加入底物 A、B 各 50μL,37℃避光孵育 15min。
7. 所有孔加入终止液 50μL,15min 内,在 450nm 波长处测定各孔的 OD 值。
结果判断
绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。
免责声明
试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或生物体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担, 本公司概不负责。
严格按照说明书操作,不同批号不可交换使用,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。

猪因子(VWF)酶联免疫试剂盒

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